標(biāo)準(zhǔn)化的微生物采集方法

（一）基本原則
1、發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查，二、三級醫(yī)院微生物標(biāo)本送檢率不應(yīng)低于70%。
2、盡量在抗菌藥物使用之前采集標(biāo)本。
3、標(biāo)本采集時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，減少或避免機體正常菌群及其它雜菌污染。
4、標(biāo)本采集后應(yīng)立即送至細(xì)菌室。床旁接種可提高病原菌檢出率。
5、以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、肛拭或傷口拭子，宜插入運送培養(yǎng)基送檢。
6、送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康模辜?xì)菌室能正確選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。
（二）血液與骨髓的送檢方法
1、通常采血部位為肘靜脈。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時，以肘動脈或股動脈采血為宜，切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。
2、采血部位的局部皮膚應(yīng)嚴(yán)格消毒。將采集的血液注入血培養(yǎng)瓶前，應(yīng)更換針頭或過火消毒針頭。
3、每次采血量成人5~10ml，嬰幼兒1~2ml，培養(yǎng)基與血液之比以10：1為宜，以稀釋血液中的抗生素。
4、懷疑菌血癥因盡早采血，體溫上升階段采血可提高陽性率，但要防止因等待而延誤時機。對已用抗菌藥物而不能停藥者，可在下次用藥前采血。
5、對疑為細(xì)菌性骨髓炎或傷寒病人，在病灶或髂前（后）上棘處嚴(yán)格消毒后抽取骨髓1ml 作細(xì)菌培養(yǎng)。
（三）尿液的送檢方法
1、中段尿：女性采樣前應(yīng)先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口；男性須翻轉(zhuǎn)包皮沖洗，用0.1%新潔爾滅消毒尿道口，滅菌紗布擦干后，收集標(biāo)本。
2、導(dǎo)尿管導(dǎo)尿采樣可減少污染。對留置導(dǎo)尿者，可用碘酒消毒尿道口處的導(dǎo)尿管壁，用聯(lián)空針筒的細(xì)針斜穿管壁抽吸尿液；或拔去閉式引流的集尿袋，棄取導(dǎo)尿管前段尿液，留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢。不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本。
3、送檢標(biāo)本以晨起*次尿為宜。
4、室溫下尿標(biāo)本擔(dān)擱稍久可導(dǎo)致尿內(nèi)細(xì)菌濃度明顯增加而影響病原菌與污染菌的區(qū)分。不能立即送檢者，可暫存4℃冰箱。
（四）痰標(biāo)本的送檢方法
1、咳痰：清水反復(fù)漱口后用力咳痰，從呼吸道深部咳出新鮮痰液于無菌容器送檢。痰量極少者可用45℃10%氯化鈉溶液霧化吸入導(dǎo)痰。
2、對咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口抵達氣管腔內(nèi)吸引痰液。用纖維支氣管鏡可直接在病灶部位采集高濃度的感染病原菌，但不能*避免咽喉部正常菌群感染。
3、雙側(cè)肺部感染伴人工氣道如氣管切開或氣管插管患者，可用吸痰管經(jīng)人工氣道估插至葉支氣管水平吸引痰液。
4、痰標(biāo)本不能及時送檢者，可暫存4℃冰箱。室溫下?lián)鷶R數(shù)小時定植于口咽部的非致病菌呈過度生長而肺炎鏈球菌、葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率明顯降低
（五）手術(shù)創(chuàng)口、燒傷創(chuàng)面于膿液
1、無菌生理鹽水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深部的膿液和分秘物，置運送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。
2、對未潰瘍的膿腫宜用碘酒、酒精消毒皮膚后，以無菌注射器抽取膿液送檢；也可于切開膿腫時用無菌棉拭子采樣。
3、采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑。
（六）糞便的送檢方法
1、排便后，挑取有膿血、黏液部分的糞便2~3g（液狀糞便則取絮狀物），盛于蠟紙袋內(nèi)送檢。
2、對不易獲取糞便者或嬰幼兒，可用肛拭采集。將拭子前端用無菌甘油水濕潤。然后插入肛門約4~5cm（幼兒約2~3cm）處，輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面黏液后退出，置運送普及內(nèi)送檢。
（七）咽拭、口腔拭子的送檢
1、病人清水漱口后，由檢查者將其舌外拉時懸幽垂盡可能向外牽引，棉拭子越過舌根到咽后壁或懸幽垂的后側(cè)，反復(fù)擦拭數(shù)次，插入運送培養(yǎng)基。棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔黏膜和唾液。
對化膿性扁桃體炎或口腔念珠菌病，用棉拭
臨床標(biāo)本的處理
1、血標(biāo)本
1． 1常見細(xì)菌
革蘭陽性菌：肺炎鏈球菌、金葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性鏈球菌、糞腸球菌、類白喉棒狀桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌等。
革蘭陰性菌：腦膜炎奈瑟菌、卡他布蘭漢菌、傷寒沙門菌、流感嗜血桿菌、大腸艾希菌、變形桿菌、產(chǎn)汽腸桿菌、銅綠假單孢菌、肺炎克雷伯菌等。
1．2臨床意義
血液培養(yǎng)應(yīng)用于傷寒、副傷寒、化膿性細(xì)菌和其他革蘭陰性桿菌引起的敗血癥的診斷。
目前引起敗血癥的細(xì)菌多為金葡萄球菌和大腸艾希菌。
疥、癰和膿腫繼發(fā)的敗血癥主要是金葡萄球菌和溶血性鏈球菌引起。
尿道、膽、胃腸黏膜損傷引起的敗血癥以大腸艾希菌多見，其次為變形桿菌、產(chǎn)汽腸桿菌、葡萄球菌。
急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎以金葡萄球菌、溶血性鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌常見；亞急性心內(nèi)膜炎以草綠色鏈球菌多見，偶見腸球菌；化膿性心包炎以金葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌多見。
血液病、肝硬化引起的敗血癥金葡萄球菌和銅綠假單孢菌為主。
彌漫性血管內(nèi)凝血以革蘭陰性桿菌為主。
燒傷后敗血癥以銅綠假單孢菌為主。
3、 痰標(biāo)本
常見細(xì)菌： 肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、金葡萄球菌、結(jié)核分枝桿菌；腦膜炎奈瑟菌、卡他布蘭漢菌、肺炎克雷伯菌、大腸艾希菌、銅綠假單孢菌、沙雷菌、流感嗜血桿菌。
痰標(biāo)本：須接種2個血平板,一個放普通孵箱,另一個放CO2孵箱.痰標(biāo)本接種于血平板、麥康凱平板、巧克力平板。巧克力平板是用來篩選流感嗜血桿菌。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌的檢出率是衡量一個細(xì)菌室水平的重要依據(jù)，因此對于包括以上兩種菌在內(nèi)的苛養(yǎng)菌的鑒定應(yīng)引起重視。痰標(biāo)本接種時，*區(qū)劃完線后，接種環(huán)必須過火消毒，否則將達不到分區(qū)的效果。
痰標(biāo)本建議接種2個血平板、一個巧克力平板、一個麥康凱平板。 痰標(biāo)本于咽標(biāo)本的處理基本相同。
4、 尿標(biāo)本
常見細(xì)菌：大腸艾希菌、葡萄球菌、變形桿菌。
注意事項：尿標(biāo)本不能離心，離心將使污染菌也集中于沉淀部分，導(dǎo)致錯誤結(jié)果。一般而言，菌落大于105/ml代表真正感染，103/ml以下表示污染，104～105為懷疑污染，如病人的排尿速度太快或接受藥物治療或尿的pH小于5.0，比重小于1.003時，細(xì)菌的數(shù)目可能降低。因此病人若已服用抗生素，104菌落即需進行鑒定和抗生素藥敏試驗。